酶聯(lián)產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝

一、原理

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原-抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

二、主要生產(chǎn)工藝

（一）酶標(biāo)板的制備：

1.工藝流程

（A）包被液的配制→ （C）酶標(biāo)板的包被 →（D）酶標(biāo)板封閉 → （E）酶標(biāo)板的干燥、真空包裝                       ↑

                                     （B）封閉液的配制

2.關(guān)鍵點控制

（1）包被：

1）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)；

2）包被液量控制在要求范圍內(nèi)；

3）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。

關(guān)鍵設(shè)備包括：包被機(jī)、精密天平、加樣器。

（2）封閉：

1）確認(rèn)洗板的次數(shù)；

2）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)；

3）封閉液量控制在要求范圍內(nèi)；

4）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。

關(guān)鍵設(shè)備包括：包被機(jī)、洗板機(jī)、精密天平、加樣器。

（3）干燥、真空包裝

1）干燥的溫濕度在要求范圍內(nèi)；

2）干燥結(jié)束的酶標(biāo)板逐一裝入鋁箔袋中同時放入一袋干燥劑，裝袋同時要將酶標(biāo)板標(biāo)識不清楚的、板孔有缺損的挑出報廢。

關(guān)鍵設(shè)備包括：真空包裝機(jī)。

（二）酶標(biāo)試劑的制備：

1.工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2.關(guān)鍵點控制

（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（2）確認(rèn)配制溶液的濃度、PH值在要求范圍內(nèi)；

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備包括：精密天平、分裝機(jī)。

（三）陰、陽性對照的制備：

1.工藝流程

（A）原料的滅活→（B）液體的配制→（C）液體的分裝

2.關(guān)鍵點控制

（1）控制滅活溫度和時間；

（2）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備包括：水浴鍋、精密天平、分裝機(jī)。

（四）其他組分的制備：

1.工藝流程

（A）液體的配制→（B）液體的分裝

2.關(guān)鍵點控制

（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；

（2）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)

（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。

關(guān)鍵設(shè)備包括：精密天平、分裝機(jī)。