體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系檢查要點指南
（2013版）
按照醫(yī)療器械管理的體外診斷試劑是一類特殊的產(chǎn)品，包括可單獨使用或與儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)組合使用，在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評價以及遺傳性疾病的預(yù)測過程中，用于對人體樣本（各種體液、細(xì)胞、組織樣本等）進(jìn)行體外檢測的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）等。目前臨床使用的體外診斷試劑主要包括血液和體液檢驗 ,微生物鑒定及藥敏,生化檢驗,免疫學(xué)檢驗和分子診斷試劑以及染液、樣品處理物等。其研制、生產(chǎn)、檢驗等過程的控制能力直接影響著產(chǎn)品的質(zhì)量。
本指南是對國家食品藥品監(jiān)督管理局2007年發(fā)布實施的《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細(xì)則（試行）》中重點檢查條款的解釋和說明，并歸納明確了體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量管理體系中重點環(huán)節(jié)的審查要求，旨在幫助北京市醫(yī)療器械監(jiān)管人員對體外診斷試劑產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理體系的認(rèn)知和掌握，可作為北京市藥品監(jiān)督管理局組織實施的《醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證》核發(fā)、變更、換證等現(xiàn)場檢查、體外診斷試劑生產(chǎn)實施細(xì)則檢查、醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)督檢查等各項檢查的參考資料，指導(dǎo)和規(guī)范醫(yī)療器械監(jiān)管人員對體外診斷試劑生產(chǎn)管理體系的監(jiān)督檢查工作，同時，為生產(chǎn)企業(yè)開展體外診斷試劑生產(chǎn)管理活動提供參考。
當(dāng)國家相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、檢查要求發(fā)生變化時，應(yīng)重新討論以確保本指南持續(xù)符合要求。本指南不包括產(chǎn)品研制情況有關(guān)要求，也不適用于體外診斷試劑分包裝生產(chǎn)模式。
一、人員管理要求
（一）生產(chǎn)和質(zhì)量的負(fù)責(zé)人應(yīng)具有醫(yī)學(xué)檢驗、臨床醫(yī)學(xué)或藥學(xué)等相關(guān)專業(yè)背景或從事相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)和質(zhì)量管理的實踐經(jīng)驗，生產(chǎn)負(fù)責(zé)人和質(zhì)量負(fù)責(zé)人不得互相兼任。
與醫(yī)學(xué)檢驗、臨床醫(yī)學(xué)或藥學(xué)相關(guān)的專業(yè)包括：醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、檢驗學(xué)、細(xì)菌學(xué)、病毒學(xué)、生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、血液學(xué)、微生物學(xué)等。
（二）從事生產(chǎn)操作和檢驗的人員應(yīng)經(jīng)過崗前專門培訓(xùn)，培訓(xùn)記錄應(yīng)涉及本崗位工作的操作規(guī)程，可采用口試、筆試或?qū)嵅俚姆绞剑⒈Ａ襞嘤?xùn)記錄。
（三）檢驗員應(yīng)具有與醫(yī)學(xué)檢驗、臨床醫(yī)學(xué)或藥學(xué)相關(guān)的專業(yè)背景或從事該專業(yè)工作經(jīng)歷，考核合格后由企業(yè)任命方可上崗。企業(yè)還應(yīng)配備專職成品檢驗員。
（四）對生產(chǎn)高生物活性、高毒性、強(qiáng)傳染性、強(qiáng)致敏性等有特殊要求產(chǎn)品的企業(yè)，應(yīng)建立人員花名冊，對生產(chǎn)和質(zhì)量檢驗的人員應(yīng)進(jìn)行登記，并重點對《危險化學(xué)品安全管理條例》、《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》等法規(guī)進(jìn)行培訓(xùn)，保存相關(guān)培訓(xùn)記錄。
二、生產(chǎn)環(huán)境與設(shè)施設(shè)備控制要求
（一）在同一潔凈室（區(qū)）內(nèi)生產(chǎn)工藝不同的產(chǎn)品時應(yīng)做到有效隔離，以避免相互混淆和污染。有數(shù)條生產(chǎn)線同時進(jìn)行生產(chǎn)時，企業(yè)應(yīng)采取隔離或其它有效防止混淆的措施。
（二）企業(yè)應(yīng)確定工藝所需的空氣凈化級別，對生產(chǎn)環(huán)境有凈化要求的產(chǎn)品除應(yīng)當(dāng)滿足《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細(xì)則（試行）》的通用要求外，其生產(chǎn)環(huán)境潔凈度還應(yīng)當(dāng)滿足以下要求：
1.陰性、陽性血清、質(zhì)�；蜓褐破返奶幚聿僮鲬�(yīng)當(dāng)在至少
10，000級環(huán)境下進(jìn)行，與相鄰區(qū)域保持相對負(fù)壓，并符合防護(hù)規(guī)定。
2.酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑、免疫熒光試劑、免疫發(fā)光試劑、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑、金標(biāo)試劑、干化學(xué)法試劑、細(xì)胞培養(yǎng)基、校準(zhǔn)品與質(zhì)控品、酶類、抗原、抗體和其他活性類組分的配制及分裝等產(chǎn)品的配液、包被、分裝、點膜、干燥、切割、貼膜、以及內(nèi)包裝等工藝環(huán)節(jié)，至少應(yīng)在100，000級凈化環(huán)境中進(jìn)行操作。無菌物料的分裝必須在局部百級環(huán)境中進(jìn)行。
3.對生產(chǎn)環(huán)境沒有空氣凈化要求的體外診斷試劑，如普通化學(xué)類診斷試劑，應(yīng)當(dāng)在清潔環(huán)境內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。清潔條件的基本要求：要有防塵、通風(fēng)、防止昆蟲、其他動物以及異物混入等措施；人流物流分開，人員進(jìn)入生產(chǎn)車間前應(yīng)當(dāng)有換鞋、更衣、佩戴口罩和帽子、洗手、手消毒等清潔措施；生產(chǎn)場地的地面應(yīng)當(dāng)便于清潔，墻、頂部應(yīng)平整、光滑，無顆粒物脫落；操作臺應(yīng)當(dāng)光滑、平整、無縫隙、耐腐蝕，便于清洗、消毒；應(yīng)當(dāng)對生產(chǎn)區(qū)域進(jìn)行定期清潔、清洗和消毒；應(yīng)當(dāng)根據(jù)生產(chǎn)要求對生產(chǎn)車間的溫濕度進(jìn)行控制。
普通化學(xué)類試劑一般包括不含生物活性物質(zhì)的生化試劑，如無機(jī)離子測定試劑盒、白蛋白測定試劑盒（BCG法）、總膽固醇測定試劑盒（COD-CE-PAP法）等；電解質(zhì)分析儀隨機(jī)試劑、生化分析儀用稀釋液等；溶血劑等。
（三）根據(jù)工藝規(guī)程等文件，應(yīng)明確潔凈室(區(qū)) 溫濕度的要求、監(jiān)測頻次和記錄的要求，溫濕度監(jiān)測裝置應(yīng)處于正常的工作狀態(tài)，并有檢定標(biāo)識；空調(diào)機(jī)組應(yīng)有溫濕度控制設(shè)施。潔凈室（區(qū)）內(nèi)的溫度、相對濕度可參照《無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范》（YY0033-2000）執(zhí)行或自行驗證，對空氣有干燥要求的操作間，應(yīng)配置空氣干燥設(shè)備，保證物料不會受潮變質(zhì)，干燥間濕度一般為10％～30％，生物活性原料要求儲存于-15℃以下。有特殊要求的，根據(jù)特殊要求儲存。
（四）生產(chǎn)激素類試劑組分、操作放射性物質(zhì)的潔凈室（區(qū)）應(yīng)采用獨立的專用的空氣凈化系統(tǒng)，且凈化空氣不得循環(huán)使用。已知現(xiàn)有的激素類試劑名錄詳見附件1。
（五）強(qiáng)毒微生物操作區(qū)、芽胞菌制品操作區(qū)應(yīng)與相鄰區(qū)域保持相對負(fù)壓，配備獨立的空氣凈化系統(tǒng)，排出的空氣不得循環(huán)使用。
（六）對特殊的高致病性病原體的采集、制備，應(yīng)按照《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》等相關(guān)規(guī)定，具備P3級實驗室等相應(yīng)設(shè)施。P3級實驗室應(yīng)滿足《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》要求，具體見附件2。
高傳染性、高致病性病原體的范圍：《人間傳染的病原微生物名錄》中危害程度為第一類和第二類的病原體、《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》中的一類和二類菌種。
特殊的高致病性病原體具體參見《人間傳染的病原微生物名錄》中需要在生物安全P3級、P4級實驗室實驗的病原體。
（七）聚合酶鏈反應(yīng)試劑（PCR）的生產(chǎn)和檢定應(yīng)在各自獨立的建筑物中，防止擴(kuò)增時形成的氣溶膠造成交叉污染。其生產(chǎn)和質(zhì)檢的器具不得混用，用后應(yīng)嚴(yán)格清洗和消毒。
各自獨立的建筑物是指聚合酶鏈反應(yīng)試劑（PCR）的生產(chǎn)和檢定應(yīng)分別在不同建筑物內(nèi)，不允許在同一建筑物內(nèi)完成生產(chǎn)和檢定。
陽性質(zhì)粒的生產(chǎn)一般分為菌液培養(yǎng)、質(zhì)粒提取、稀釋分裝等過程，要求稀釋分裝應(yīng)有防止氣溶膠污染的措施。
（八）與試劑直接接觸的設(shè)備和器具應(yīng)易于清潔和保養(yǎng)、不與成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或吸附作用，不會對試劑造成污染。應(yīng)對與產(chǎn)品直接接觸的設(shè)備和器具予以驗證，并保存記錄。
1.與試劑直接接觸的設(shè)備一般包括：包被機(jī)、封閉機(jī)、灌裝機(jī)、蠕動泵、洗板機(jī)、攪拌器、切條機(jī)、點膜機(jī)等。
2.與試劑直接接觸的器具一般包括：塑料桶，量筒，燒杯，錐形瓶、玻璃瓶等。
3.常見的體外診斷試劑生產(chǎn)、檢驗設(shè)備清單詳見附件3。
（九）生產(chǎn)中使用的動物室應(yīng)在隔離良好的建筑體內(nèi)，與生產(chǎn)、質(zhì)檢區(qū)分開，不得對生產(chǎn)造成污染。
三、物料控制要求
（一）應(yīng)明確各類物料的倉儲環(huán)境和控制要求，并定期監(jiān)測，提供環(huán)境監(jiān)測的記錄。倉儲現(xiàn)場的環(huán)境監(jiān)測設(shè)施應(yīng)定期計量、校準(zhǔn)；應(yīng)具有校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和生物活性物質(zhì)等需要低溫保存的倉庫（如有）。冷藏條件溫度計量裝置的量程應(yīng)符合要求。
（二）所有物料的名稱、批號、有效期和檢驗狀態(tài)等標(biāo)識必須明確。標(biāo)識應(yīng)包括名稱、批號、有效期和檢驗狀態(tài)等；可用空間區(qū)域劃分識別檢驗狀態(tài)，如檢驗區(qū)、合格品區(qū)等；一般情況下，物料無規(guī)定使用期限的，其儲存期限應(yīng)不超過三年，規(guī)定有效期的，遵其規(guī)定。
（三）物料應(yīng)按照先進(jìn)先出的原則進(jìn)行操作；應(yīng)明確規(guī)定中間品的儲存條件和期限。已被取樣的包裝應(yīng)有取樣標(biāo)記。應(yīng)對檢測用外購標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶后中間品的儲存條件及有效期進(jìn)行驗證。
（四）易燃、易爆、有毒、有害、具有污染性或傳染性、具有生物活性或來源于生物體的物料的存放應(yīng)符合《危險化學(xué)品安全管理條例》、《生物制品生產(chǎn)、檢定用菌種、毒種管理規(guī)程》、《人間傳染的病原微生物名錄》、《常用危險化學(xué)品的分類及標(biāo)志》、《危險貨物品名錄》、《麻醉品和精神藥品名錄》等相關(guān)國家規(guī)定。上述物料應(yīng)做到專區(qū)存放并有明顯的識別標(biāo)識，應(yīng)由專門人員負(fù)責(zé)保管和發(fā)放。發(fā)放后剩余物料應(yīng)妥善保管。
易燃、易爆、有毒、有害、具有污染性或傳染性、具有生物活性或來源于生物體的物料見附件4。
（五）生產(chǎn)過程中所涉及的化學(xué)、生物及其它危險品，企業(yè)應(yīng)列出清單，并制定相應(yīng)的防護(hù)規(guī)程，其環(huán)境、設(shè)施與設(shè)備應(yīng)符合國家相關(guān)安全規(guī)定。
生產(chǎn)過程中涉及的化學(xué)、生物及其它危險品一般包括：甲醇、乙醇、硫酸、鹽酸、二甲基甲酰胺、氫氧化鈉、三氯甲烷、硫柳汞鈉、甲醛、抗原抗體生物活性原料、病毒菌種等。
（六）應(yīng)形成具有污染性、傳染性的物料、高風(fēng)險的生物活性物料以及危險度二級及以上的病原體物料清單，詳見附件5。
（七）.一部分：劑高生物活性、高毒性、強(qiáng)傳染性、強(qiáng)致敏性產(chǎn)品可參照《危險貨物品名表》。
生物活性是指能引起細(xì)胞正常機(jī)理發(fā)生改變的能力，主要指一些基因表達(dá)產(chǎn)物如具有酶活的抑癌基因表達(dá)蛋白；還有一些激素類物質(zhì)如性激素。高生物活性物質(zhì)限定范圍為激素類物質(zhì)。
高致敏性物質(zhì)是指能引起個體強(qiáng)烈過敏反應(yīng)的物質(zhì)如青霉素、鏈霉素、花粉等。
應(yīng)明確該類物料的使用管理的要求，物料的領(lǐng)取和操作應(yīng)在受控條件下進(jìn)行，不應(yīng)造成傳染、污染或泄漏等。物料操作應(yīng)在單獨的凈化間進(jìn)行，高風(fēng)險的生物活性物料操作間應(yīng)與相鄰區(qū)域保持負(fù)壓，排出的空氣不能循環(huán)使用，高風(fēng)險生物活性物料和危險度二級及以上的病原體物料操作間內(nèi)應(yīng)設(shè)有生物安全柜，空氣應(yīng)進(jìn)行除菌過濾方可排出。應(yīng)有對陽性血清的防護(hù)措施，如滅活記錄、不得直接用手接觸等。
（八）應(yīng)明確生產(chǎn)檢驗過程中所產(chǎn)生廢物、廢液的種類，生產(chǎn)中的廢液、廢物等應(yīng)有完備的回收與無害化處理措施，并保留回收處理的記錄。如采取委托方式，應(yīng)與受托方簽訂委托協(xié)議，并保存相關(guān)記錄。
生產(chǎn)檢驗過程中所產(chǎn)生廢物、廢液一般包括：口罩、手套、槍頭、反應(yīng)完成的酶標(biāo)板、實驗完畢培養(yǎng)基、洗板機(jī)廢液桶內(nèi)液體，試劑盒剩余液體、微生物無菌檢查廢液以及陽性等傳染性物料等。
（九）不同性狀和儲存要求的物料應(yīng)進(jìn)行分類存放，按效期管理。應(yīng)建立復(fù)驗制度。應(yīng)制定倉儲與運輸管理制度，應(yīng)有不同性狀和儲存要求的物料的分類要求；復(fù)驗制度應(yīng)明確復(fù)驗時機(jī)及復(fù)驗方法。冷藏、冷凍的物料應(yīng)分類分開存放，并標(biāo)明有效期。
1.復(fù)驗：指超過自定效期的物料繼續(xù)使用前應(yīng)檢驗。
2.物料管理制度應(yīng)有對校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的存放管理；未規(guī)定有效期的物料其儲存有效期一般不超過三年。
3.校準(zhǔn)品：
其值在一個校準(zhǔn)函數(shù)中用作獨立變量的參考物質(zhì)。應(yīng)具有定值和已知的測量不確定度，其目的應(yīng)是校準(zhǔn)某一測量系統(tǒng)，從而建立此系統(tǒng)測量結(jié)果的計量學(xué)溯源性。
4.質(zhì)控品：
用于體外診斷的質(zhì)量控制物質(zhì)(定值和非定值)，是一種旨在用于醫(yī)學(xué)檢測系統(tǒng)中使用的物質(zhì)、材料等，其目的是評價或驗證測量精密度或由于試劑或分析儀器的變化導(dǎo)致的分析偏差等。用于能力驗證、實驗室內(nèi)質(zhì)量控制等。
四、采購控制要求
（一）應(yīng)確定外購、外協(xié)物料清單，應(yīng)至少包含以下信息：名稱、規(guī)格型號、分類等級，并明確所有物料的技術(shù)指標(biāo)和質(zhì)量要求。
外購、外協(xié)物料清單應(yīng)包含包材、標(biāo)簽和檢驗中的耗材（質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、培養(yǎng)基等）；物料清單中應(yīng)包括申報產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中所列的原料。應(yīng)對校準(zhǔn)品和質(zhì)控品等檢驗用物料進(jìn)行驗收并記錄。
（二）應(yīng)能提供外購的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的來源和溯源性的相關(guān)證明。
（三）應(yīng)能證明質(zhì)控血清的來源，明確使用目的（用于科研或?qū)φ掌罚�，與供方簽訂技術(shù)協(xié)議。應(yīng)由企業(yè)或醫(yī)療機(jī)構(gòu)測定病原微生物及明確定值范圍。應(yīng)對其來源地、定值區(qū)間、滅活狀態(tài)、購買數(shù)量、保存、使用狀態(tài)等信息有明確記錄，并由專人負(fù)責(zé)，確保物料的質(zhì)量和穩(wěn)定性。外購的商品化質(zhì)控物應(yīng)能溯源，質(zhì)控血清至少應(yīng)提供乙肝、丙肝、艾滋、梅毒陰性報告。
（四）有特殊要求的物料應(yīng)根據(jù)國家相關(guān)法規(guī)要求進(jìn)行采購和進(jìn)貨檢驗，如氰化鉀、疊氮鈉等。
五、生產(chǎn)過程控制要求
（一）應(yīng)按照國家批準(zhǔn)的工藝進(jìn)行生產(chǎn)，應(yīng)制定生產(chǎn)所需的工序流程、工藝文件和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，明確關(guān)鍵工序或特殊工序，確定質(zhì)量控制點，并規(guī)定應(yīng)形成的生產(chǎn)記錄。
本指南主要例舉了幾種常見的體外診斷試劑產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流程，見附件6～10。例舉這幾種產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程是為了更直接的體現(xiàn)不同試劑產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的異同，并不代表作為生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品生產(chǎn)的依據(jù)。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)結(jié)合自己的實際情況，制訂相應(yīng)產(chǎn)品的工藝流程及質(zhì)量要求。
（二）當(dāng)生產(chǎn)工藝變更足以影響產(chǎn)品安全性、穩(wěn)定性時，應(yīng)重新申報變更生產(chǎn)工藝，并按程序進(jìn)行工藝修訂。
（三）應(yīng)明確每批產(chǎn)品中關(guān)鍵物料的平衡關(guān)系，并對每批產(chǎn)品中關(guān)鍵物料進(jìn)行物料平衡核查。物料平衡計算公式為：
實際產(chǎn)出量（合格+不合格+取樣等）/理論產(chǎn)出量×100%
應(yīng)至少要求從關(guān)鍵原料到成品環(huán)節(jié)計算總的物料平衡；應(yīng)有對物料平衡可接受標(biāo)準(zhǔn)的要求；應(yīng)明確物料平衡超出可接受標(biāo)準(zhǔn)的處理方法。
（四）不同批次產(chǎn)品生產(chǎn)工序結(jié)束后必須進(jìn)行清場，確認(rèn)合格后才可以入場進(jìn)行其它批次產(chǎn)品的生產(chǎn)，企業(yè)應(yīng)保存清場記錄。
（五）清場時，配制和分裝器具等應(yīng)當(dāng)進(jìn)行清洗、干燥等潔凈處理，并進(jìn)行驗證，必要時，器具清洗干燥后應(yīng)有有效保存時間的驗證。
（六）生產(chǎn)和檢驗用的菌毒種應(yīng)建立生產(chǎn)用菌毒種的原始種子批、主代種子批和工作種子批系統(tǒng)。
（七）生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)建立原始細(xì)胞庫、主代細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫。應(yīng)建立細(xì)胞庫檔案資料和細(xì)胞操作日志。自行制備抗原或抗體，應(yīng)對所用原料的來源和性質(zhì)有詳細(xì)的記錄并可追溯。
六、產(chǎn)品檢驗與質(zhì)量控制要求
（一）使用一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、二級校準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)能夠?qū)α恐颠M(jìn)行溯源，明確其來源、準(zhǔn)確度及不確定度。
1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：即參考物質(zhì)，具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了的特性，用以校準(zhǔn)測量裝置、評價測量方法或給材料賦值的一種材料或物質(zhì)。體外診斷試劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是指具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了的特性，用以校準(zhǔn)測量裝置、評價測量方法或給材料賦值的一種材料和物質(zhì)。
2.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分級：
（1）一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
1）用絕對測量法或兩種以上不同原理的準(zhǔn)確可靠的方法定值。在只有一種定值方法的情況下，用多個實驗室以同種準(zhǔn)確可靠的方法定值；
2）準(zhǔn)確度具有國內(nèi)最高水平，均勻性在準(zhǔn)確度范圍之內(nèi)；
3）穩(wěn)定性在一年以上或達(dá)到國際上同類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的先進(jìn)水平；
4）包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范的要求。
（2）二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
1）用與一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較測量的方法或一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法定值；
2）準(zhǔn)確度和均勻性未達(dá)到一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的水平，但能滿足一般測量的需要；
3）穩(wěn)定性在半年以上，或能滿足實際測量的需要；
4）包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范的要求。
（二）對檢測中使用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品應(yīng)建立臺帳及使用記錄。應(yīng)記錄其來源、批號、效期、溯源途徑（或靶值轉(zhuǎn)換方法）、主要技術(shù)指標(biāo)、保存狀態(tài)等信息。應(yīng)定期復(fù)驗其性能并保存記錄。
（三）對不具備檢測能力的外購物料，企業(yè)應(yīng)制定驗收規(guī)程。
（四）如委托檢驗，受托方應(yīng)當(dāng)具備相應(yīng)的資質(zhì)條件，企業(yè)應(yīng)有委托檢驗協(xié)議，協(xié)議內(nèi)容應(yīng)包括委托檢驗的數(shù)量、周期、項目要求；并保存檢驗報告和驗收記錄。
（五）如試樣，企業(yè)應(yīng)有試樣驗證的驗收規(guī)程和記錄，并保存試樣批號、試樣生產(chǎn)記錄、檢測報告、操作人員簽字、批準(zhǔn)人員簽字等相關(guān)記錄。
注：有關(guān)工藝用水管理要求參照《醫(yī)療器械工藝用水檢查要點指南（2010版）》執(zhí)行，有關(guān)潔凈間管理的要求參照《醫(yī)療器械潔凈室（區(qū)）檢查要點指南（2013版）》執(zhí)行。
附件1：現(xiàn)有的激素類試劑名錄
1.促黃體生成素檢測試劑
2.促卵泡生成素檢測試劑
3.泌乳素檢測試劑
4.人絨毛膜促性腺激素檢測試劑
5.β-人絨毛膜促性腺激素檢測試劑
6.總甲狀腺素檢測試劑
7.游離甲狀腺素檢測試劑
8.總?cè)饧谞钕僭彼釞z測試劑
9.游離三碘甲狀腺原氨酸檢測試劑
10.促甲狀腺激素檢測試劑
11.甲狀腺素結(jié)合力檢測試劑
12.新生兒促甲狀腺素檢測試劑
13.全段甲狀旁腺激素檢測試劑
14.睪酮檢測試劑
15.雌二醇檢測試劑
16.甲狀腺球蛋白（TG）檢測試劑
17.性激素結(jié)合球蛋白檢測試劑
18.雌三醇檢測試劑
19.孕酮檢測試劑
20.胰島素檢測試劑
21.C肽檢測試劑
22.促腎上腺皮質(zhì)激素檢測試劑
23.皮質(zhì)醇檢測試劑
24.17α-羥孕酮檢測試劑
25.17-羥類固醇檢測試劑
26.17-酮類固醇檢測試劑
27.香草扁桃酸檢測試劑
28.醛固酮檢測試劑
29.生長激素檢測試劑
30.雄烯二酮檢測試劑
31.硫酸去氫表雄酮檢測試劑
32.促紅細(xì)胞生成素檢測試劑
33.促卵泡生成激素（FSH）檢測試劑
34.降鈣素檢測試劑
附件2：三級生物安全防護(hù)實驗室設(shè)置要求
實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學(xué)實驗除外)應(yīng)在三級生物安全防護(hù)實驗室中進(jìn)行。
一、安全設(shè)備和個體防護(hù)
（一）實驗室中必須安裝Ⅱ級或Ⅱ級以上生物安全柜。
（二）所有涉及感染性材料的操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。當(dāng)這類操作不得不在生物安全柜外進(jìn)行時，必須采用個體防護(hù)與使用物理抑制設(shè)備的綜合防護(hù)措施。
（三）在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護(hù)設(shè)備。
（四）當(dāng)不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi)時，應(yīng)使用呼吸保護(hù)裝置。
（五）工作人員在進(jìn)入實驗室工作區(qū)前，應(yīng)在專用的更衣室(或緩沖間)穿著背開式工作服或其他防護(hù)服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室�？稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑�。
（六）工作時必須戴手套(兩副為宜)。一次性手套必須先消毒后丟棄。
（七）在實驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用�？膳鋫鋺�(yīng)急藥品。
二、實驗室設(shè)計和建造的特殊要求
（一）選址
三級生物安全防護(hù)實驗室可與其他用途房屋設(shè)在一棟建筑物中，但必須自成一區(qū)。該區(qū)通過隔離門與公共走廊或公共部位相隔。
（二）平面布局
1.三級生物安全防護(hù)實驗室的核心區(qū)包括實驗間及與之相連的緩沖間。
2.緩沖間形成進(jìn)入實驗間的通道。必須設(shè)兩道連鎖門，當(dāng)其中一道門打開時，另一道門自動處于關(guān)閉狀態(tài)。如使用電動連鎖裝置，斷電時兩道門均必須處于可打開狀態(tài)。在緩沖間可進(jìn)行二次更衣。
3.當(dāng)實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)不設(shè)自動控制裝置時，緩沖間面積不宜過大，不宜超過實驗間面積的八分之一。
4.Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜的安裝位置應(yīng)遠(yuǎn)離實驗間入口，避開工作人員頻繁走動的區(qū)域，且有利于形成氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域的氣流流型。
（三）圍護(hù)結(jié)構(gòu)
1.實驗室(含緩沖間)圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面必須光滑耐腐蝕、防水，以易于消毒清潔。所有縫隙必須加以可靠密封。
2.實驗室內(nèi)所有的門均可自動關(guān)閉。
3.除觀察窗外，不得設(shè)置任何窗戶。觀察窗必須為密封結(jié)構(gòu)，所用玻璃為不碎玻璃。
4.地面應(yīng)無滲漏，光潔但不滑。不得使用地磚和水磨石等有縫隙地面。
5.天花板、地板、墻間的交角均為圓弧形且可靠密封，施工時應(yīng)防止昆蟲和老鼠鉆進(jìn)墻腳。
（四）通風(fēng)空調(diào)
1.必須安裝獨立的通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)以控制實驗室氣流方向和壓強(qiáng)梯度。該系統(tǒng)必須確保實驗室使用時，室內(nèi)空氣除通過排風(fēng)管道經(jīng)高效過濾排出外，不得從實驗室的其他部位或縫隙排向室外；同時確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應(yīng)使實驗區(qū)內(nèi)的死空間降低到最小程度。
2.通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風(fēng)系統(tǒng)。
3.環(huán)境參數(shù)：相對于實驗室外部，實驗室內(nèi)部保持負(fù)壓。實驗間的相對壓強(qiáng)以－30Pa～－40Pa為宜，緩沖間的相對壓強(qiáng)以－15Pa～－20Pa為宜。實驗室內(nèi)的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜，或根據(jù)工藝要求而定。實驗室內(nèi)的空氣潔凈度以《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》（GB 50073-2001）中所定義的七級至八級為宜。實驗室人工照明應(yīng)均勻，不眩目，照度不低于500lx。
4.為確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域，實驗室內(nèi)不應(yīng)使用雙側(cè)均勻分布的排風(fēng)口布局。不應(yīng)采用上送上排的通風(fēng)設(shè)計。由生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾的空氣可通過系統(tǒng)的排風(fēng)管直接排至大氣，也可送入建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)。應(yīng)確保生物安全柜與排風(fēng)系統(tǒng)的壓力平衡。
5.實驗室的進(jìn)風(fēng)應(yīng)經(jīng)初、中、高效三級過濾。
6.實驗室的排風(fēng)必須經(jīng)高效過濾或加其他方法處理后，以不低于12m／s的速度直接向空中排放。該排風(fēng)口應(yīng)遠(yuǎn)離系統(tǒng)進(jìn)風(fēng)口位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道，但不得被送回到該建筑物的任何部位。
7.進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過濾器必須安裝在實驗室設(shè)在圍護(hù)結(jié)構(gòu)上的風(fēng)口里，以避免污染風(fēng)管。
8.實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)中，在進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)總管處應(yīng)安裝氣密型調(diào)節(jié)閥門，必要時可完全關(guān)閉以進(jìn)行室內(nèi)化學(xué)熏蒸消毒。
9.實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過濾器不得為木框架。
10.應(yīng)安裝風(fēng)機(jī)啟動自動聯(lián)鎖裝置，確保實驗室啟動時先開排風(fēng)機(jī)后開送風(fēng)機(jī)。關(guān)閉時先關(guān)送風(fēng)機(jī)后關(guān)排風(fēng)機(jī)。
11.不得在實驗室內(nèi)安裝分體空調(diào)器。
（五）安全裝置及特殊設(shè)備
1.必須在主實驗室內(nèi)設(shè)置Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜。
2.連續(xù)流離心機(jī)或其他可能產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備應(yīng)置于物理抑制設(shè)備之中，該裝置應(yīng)能將其可能產(chǎn)生的氣溶膠經(jīng)高效過濾器過濾后排出。在實驗室內(nèi)所必須設(shè)置的所有其他排風(fēng)裝置(通風(fēng)櫥、排氣罩等)的排風(fēng)均必須經(jīng)過高效過濾器過濾后方可排出。其室內(nèi)布置應(yīng)有利于形成氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域的氣流流型。
3.實驗室中必須設(shè)置不產(chǎn)生蒸汽的高壓滅菌鍋或其他消毒裝置。
4.實驗間與外部應(yīng)設(shè)置傳遞窗。傳遞窗雙門不得同時打開，傳遞窗內(nèi)應(yīng)設(shè)物理消毒裝置。感染性材料必須放置在密閉容器中方可通過傳遞窗傳遞。
5.必須在實驗室入口處的顯著位置設(shè)置壓力顯示報警裝置，顯示實驗間和緩沖間的負(fù)壓狀況。當(dāng)負(fù)壓指示偏離預(yù)設(shè)區(qū)間必須能通過聲、光等手段向?qū)嶒炇覂?nèi)外的人員發(fā)出警報.可在該裝置上增加送、排風(fēng)高效過濾器氣流阻力的顯示。
6.實驗室啟動工作期間不能停電。應(yīng)采用雙路供電電源。如難以實現(xiàn)，則應(yīng)安裝停電時可自動切換的后備電源或不間斷電源，對關(guān)鍵設(shè)備(生物安全柜、通風(fēng)櫥、排氣罩以及照明等)供電。
7.可在緩沖間設(shè)洗手池：洗手池的供水截門必須為腳踏、肘動或自動開關(guān)。洗手池如設(shè)在主實驗室，下水道必須與建筑物的下水管線分離，且有明顯標(biāo)志。下水必須經(jīng)過消毒處理。洗手池僅供洗手用，不得向內(nèi)傾倒任何感染性材料。供水管必須安裝防回流裝置。不得在實驗室內(nèi)安設(shè)地漏。
（六）其他
1.實驗臺表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱。
2.實驗室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺(架)。家具和設(shè)備的邊角和突出部位應(yīng)光滑、無毛刺，以圓弧形為宜。
3.所需真空泵應(yīng)放在實驗室內(nèi)。真空管線必須裝置在線高效過濾器。
4.壓縮空氣等鋼瓶應(yīng)放在實驗室外。穿過圍護(hù)結(jié)構(gòu)的管道與圍護(hù)結(jié)構(gòu)之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線必須裝置在線高效過濾器和防回流裝置。
5.實驗室中應(yīng)設(shè)置洗眼裝置。
6.實驗室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志。
7.實驗室內(nèi)外必須設(shè)置通訊系統(tǒng)。
8.實驗室內(nèi)的實驗記錄等資料應(yīng)通過傳真機(jī)發(fā)送至實驗室外。
附件3：常見的體外診斷試劑的生產(chǎn)、檢驗設(shè)備清單
生化試劑：
生產(chǎn)設(shè)備：天平、配液桶、燒杯、吸管、量筒、攪拌器、蠕動泵、分裝機(jī)、凍干機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等
檢測設(shè)備：PH計、電導(dǎo)率儀、生化分析儀、分光光度計
化學(xué)發(fā)光試劑：
生產(chǎn)設(shè)備：天平、離心機(jī)、配液桶、燒杯、吸管、量筒、蠕動泵、分裝機(jī)、包被機(jī)、洗板機(jī)、除濕機(jī)、干燥箱、分裝機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等
檢測設(shè)備：PH計、電導(dǎo)率儀、發(fā)光分析儀、洗板機(jī)
酶聯(lián)免疫試劑：
生產(chǎn)設(shè)備：天平、離心機(jī)、配液桶、燒杯、吸管、量筒、蠕動泵、分裝機(jī)、包被機(jī)、洗板機(jī)、干燥間、除濕機(jī)、干燥箱、分裝機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、標(biāo)簽機(jī)、貼標(biāo)機(jī)、冰箱等
檢測設(shè)備：PH計、電導(dǎo)率儀、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)
膠體金試劑：
生產(chǎn)設(shè)備：電子天平、離心機(jī)、噴膜機(jī)、噴金機(jī)、干燥間、除濕機(jī)、干燥箱、切條機(jī)、封口機(jī)、噴碼機(jī)、包裝機(jī)、冰箱等
檢測設(shè)備：PH計、紫外分光光度計、卡尺
附件4：易燃、易爆、有毒、有害、具有污染性或傳染性、具有生物活性或來源于生物體的物料
第1類 爆炸品
第2類 壓縮氣體和液化氣體
第3類 易燃液體
第4類 易燃固體、自然物品和遇濕易燃物品
第5類 氧化劑和有機(jī)過氧化物
第6類 毒害品和感染性物品
第7類 放射性物品
第8類 腐蝕品
第9類 雜類
附件5：具有污染性、傳染性的物料、高風(fēng)險的生物活性物料以及危險度二級及以上的病原體物料
一類物料：
鼠疫耶爾森氏菌、霍亂弧菌（包括EL-tor弧菌）；天花病毒、黃熱病毒（野毒株）、新疆出血熱（克里米亞剛果出血熱）病毒、東、西方馬腦炎病毒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒、拉沙熱（Lassa）病毒、馬堡（Marburg）病毒、埃波拉（Ebola）病毒、猴皰疹病毒（猴Ｂ病毒）；粗球孢子菌、莢膜組織胞漿菌、杜波氏組織胞漿菌。
二類物料：
土拉弗郎西絲氏菌、布氏菌、炭疽芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假單胞菌、類鼻疽假單胞菌、麻風(fēng)分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌；狂犬病病毒（街毒）、森林腦炎病毒、流行性出血熱病毒、國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)病人在國外引起腦脊髓炎及出血熱的其它蟲媒病毒、登革熱病毒、甲、乙型肝炎病毒；各種立克次體（包括斑疹傷寒、Q熱）；鸚鵡熱、鳥疫衣原體、淋巴肉芽腫衣原體；馬納青霉、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隱球菌、巴西芽生菌、煙曲霉、著色霉菌。
附件6：化學(xué)發(fā)光法主要生產(chǎn)工藝
一、原理
化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)�；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析包含兩個部分，即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)(在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體)直接標(biāo)記在抗原或抗體上，或酶作用于發(fā)光底物�；瘜W(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發(fā)態(tài)的中間體，當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時，同時發(fā)射出光子，利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額，該光量子產(chǎn)額與樣品中的待測物質(zhì)的量成正比，由此可以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算樣品中待測物質(zhì)的含量。
二、化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型
（一）化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析
化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)，是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物(AE)。
（二）化學(xué)發(fā)光酶免疫分析
從標(biāo)記免疫分析角度，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)，應(yīng)屬酶免疫分析，只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑，操作步驟與酶免分析完全相同：以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)（如酶標(biāo)記的抗原或抗體）進(jìn)行免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物，在信號試劑作用下發(fā)光，用發(fā)光儀進(jìn)行發(fā)光測定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)，它們有各自的發(fā)光底物。
（三）時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)
是用三價稀土離子及其螯合劑作為示蹤物，如銪（Eu3+）、鋱（Te3+）及釤（Sm3+）、鏑（De3+）等代替?zhèn)鹘y(tǒng)的熒光物質(zhì)、放射性同位素、酶和化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，來標(biāo)記抗體、抗原、多肽、激素、核酸探針或生物活性細(xì)胞，待反應(yīng)體系發(fā)生后，用時間分辨熒光儀測定最后產(chǎn)物中的熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度和相對熒光強(qiáng)度比值，判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度，達(dá)到定量分析的目的。
（四）電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)
是電化學(xué)發(fā)光(ECL)和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物，是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光二個過程。ECL 反應(yīng)底物有兩種：三氯聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)3]2+、絡(luò)合物三丙胺(TPA)。
三、主要生產(chǎn)工藝（以微孔板載體的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析為例進(jìn)行描述）
（一）固相載體的制備
1．包被板的準(zhǔn)備
準(zhǔn)備經(jīng)檢驗合格的包被板，記錄批號、數(shù)目、狀態(tài)標(biāo)識。
常規(guī)質(zhì)控項目：尺寸，外觀，包裝。
2．包被液的配制
配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原至工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)使用。
常規(guī)質(zhì)控項目：包被緩沖液配方，pH值，包被物成份。
3．包被板的包被
包被液按工藝要求加入包被板。記錄所包被的包被板數(shù)量。
常規(guī)質(zhì)控項目：包被體積，溫度，時間，過程監(jiān)控。
關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、精密天平、加樣器。
4．洗板工作液的配制（按各單位工藝要求，可以不洗板）
按配方配制洗板工作液。
常規(guī)質(zhì)控項目：洗板工作液配方，pH值。
5．封閉液的配制
按配方配制封閉液。
常規(guī)質(zhì)控項目：封閉液配方，pH值。
6．洗板和封閉
包被完成后，抽去孔內(nèi)包被液，用洗板工作液洗板后（按各單位工藝要求，可以不洗板），加入封閉液。
常規(guī)質(zhì)控項目：封閉體積，溫度，時間，過程監(jiān)控。
質(zhì)檢項目：封閉前檢驗包被均一性。
關(guān)鍵設(shè)備：包被機(jī)、（洗板機(jī)）、精密天平、加樣器。
7．抽干
封閉后的反應(yīng)板，抽干孔內(nèi)液體。
常規(guī)質(zhì)控項目：過程監(jiān)控。
8．干燥
反應(yīng)板應(yīng)按工藝的要求進(jìn)行干燥。
常規(guī)質(zhì)控項目：溫度，濕度，時間，過程監(jiān)控等。
9．密封包裝
將干燥后的反應(yīng)板用鋁箔袋密封包裝，內(nèi)放干燥劑（按各單位工藝要求，可以不放）。
常規(guī)質(zhì)控項目：密封性能，標(biāo)示及效期等。
10．反應(yīng)板（半成品）檢驗
對裝袋密封后的反應(yīng)板進(jìn)行抽樣檢驗，外觀、板內(nèi)變異、板間變異。
關(guān)鍵設(shè)備：真空包裝機(jī)。
（二）滴配過程
1．酶結(jié)合物（也稱酶標(biāo)記物）的制備（根據(jù)各產(chǎn)品實際情況，該步驟可不進(jìn)行）
采用常規(guī)過碘酸鈉——乙二醇法將相關(guān)的抗體（或抗原）標(biāo)記辣根過氧化物酶（或其他酶），酶標(biāo)記后的抗體（或抗原）應(yīng)加入適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑保存于低溫。
常規(guī)質(zhì)控項目：標(biāo)記方法，過程控制。
2．酶結(jié)合物的鑒定
（1）功能性實驗
將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋后，用于產(chǎn)品的滴配，其結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
（2）穩(wěn)定性
將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋，進(jìn)行2～8℃，及熱穩(wěn)定性實驗，滴配結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
3．酶結(jié)合物稀釋液
按酶結(jié)合物稀釋液的配方配制，存放在2～8℃保存，并于規(guī)定時間內(nèi)使用。
常規(guī)質(zhì)控項目：酶結(jié)合物稀釋液配方，pH值。
4．酶結(jié)合物工作濃度的滴配
取酶結(jié)合物，用酶結(jié)合物稀釋液稀釋到不同的濃度，用已制備好的反應(yīng)板進(jìn)行滴配。測定系列標(biāo)準(zhǔn)品及相應(yīng)的質(zhì)控品，確定使體系達(dá)到最優(yōu)的酶結(jié)合物工作濃度。
5．酶結(jié)合物工作液配制
將所需量酶結(jié)合物和酶結(jié)合物稀釋液按滴配濃度混合均勻。
質(zhì)檢項目：分裝前檢驗，用配套的反應(yīng)板進(jìn)行檢驗，外觀、靈敏度、質(zhì)控品測定值、定量產(chǎn)品應(yīng)作校準(zhǔn)品線性檢測。
6．酶結(jié)合物工作液的分裝
按工藝要求分裝酶結(jié)合物工作液。
常規(guī)質(zhì)控項目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。
7．酶結(jié)合物工作液（半成品）檢驗
對分裝后的酶結(jié)合物工作液進(jìn)行抽樣檢驗，外觀、分裝量、靈敏度、校準(zhǔn)品劑量-反應(yīng)曲線線性、質(zhì)控品測定值。
（三）校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的制備
1．稀釋液
按稀釋液的配方配制，存放在2～8℃或-20℃保存，并于有效期內(nèi)使用。
常規(guī)質(zhì)控項目：稀釋液配方，pH值。
2．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照的配制
校準(zhǔn)品、陰/陽性對照品的配制應(yīng)具有量值溯源性，可參照國家標(biāo)準(zhǔn)品、WHO標(biāo)準(zhǔn)品或其他級別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行配制。
質(zhì)檢項目：分裝前檢驗，準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值。
3．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的分裝
按工藝要求分裝校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品。
常規(guī)質(zhì)控項目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量。
4．校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品（半成品）檢驗
對分裝后的校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品進(jìn)行抽樣檢驗，外觀、分裝量、準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值。
（四）化學(xué)發(fā)光底物的制備
1．底物緩沖液
按底物緩沖液的配方配制，存放在2～8℃保存，并于有效期內(nèi)使用。
常規(guī)質(zhì)控項目：底物緩沖液配方，pH值。
2．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的配制
分別按氧化劑和發(fā)光劑的配方在底物緩沖液中加入相應(yīng)的氧化劑和發(fā)光劑
常規(guī)質(zhì)控項目：氧化劑和發(fā)光劑配方。
質(zhì)檢項目：分裝前檢驗，本底、發(fā)光強(qiáng)度。
3．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的分裝
按工藝要求分裝化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）。
常規(guī)質(zhì)控項目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。
4．化學(xué)發(fā)光底物（半成品）檢驗
對分裝后的化學(xué)發(fā)光底物進(jìn)行抽樣檢驗，外觀、分裝量、本底、靈敏度、發(fā)光強(qiáng)度。
（五）分裝、燈檢和貼簽
分裝量用減重稱量法進(jìn)行測量，把質(zhì)量換算成體積后進(jìn)行分裝量的控制。燈檢是目測檢查各組分的色澤、分裝量以及是否混濁、有雜質(zhì)等。
（六）包裝
根據(jù)試劑盒包裝SOP要求及說明書的要求，以流水線操作形式進(jìn)行包裝。包裝時應(yīng)嚴(yán)格檢查品名、批號、裝量，認(rèn)真核對各物料數(shù)量，并在關(guān)盒前進(jìn)行復(fù)核。
附件7：膠體金法主要生產(chǎn)工藝
一、原理
免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，稱為膠體金。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。膠體金類試劑是采用膠體金標(biāo)記的抗體或抗原包被于玻璃纖維膜、聚脂膜或其他載體，將相關(guān)抗原或抗體固相連接在硝酸纖維膜，應(yīng)用層析法的原理檢測樣品中的抗原或抗體的快速檢測試劑。
二、主要生產(chǎn)工藝
（一）膠體金的制備
采用枸櫞酸三鈉還原法或其他方法制備膠體金，膠體金顆粒大小應(yīng)符合規(guī)定，膠體金標(biāo)記物在510～560nm波長處應(yīng)有最大吸收值，置2～8℃保存，應(yīng)在規(guī)定的保存期內(nèi)使用。枸櫞酸三鈉還原法生產(chǎn)膠體金，金顆粒大小受濃度、煮沸時機(jī)等因素影響，改變這些因素便可生產(chǎn)出不同顆粒大小的膠體金。
膠體金的檢查指標(biāo)有顆粒的大小，粒徑的均一程度和有無凝集顆粒程度，可以通過肉眼觀察，但需要一定的經(jīng)驗，良好的膠體金應(yīng)該是清亮透明的。
所用設(shè)備：加熱攪拌設(shè)備。
（二）膠體金的標(biāo)記以及濃度的確定
膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值，在接近蛋白質(zhì)的等電點或偏堿的條件下，二者容易形成牢固的結(jié)合物。如果膠體金的pH值低于蛋白質(zhì)的等電點時，則會聚集而失去結(jié)合能力。除此以外膠體金顆粒的大小、離子強(qiáng)度、蛋白質(zhì)的分子量等都影響膠體金與蛋白質(zhì)的結(jié)合。
（三）檢測線及質(zhì)控線的制備
取已確定使用濃度的相關(guān)抗原或抗體，在硝酸纖維素膜上制備檢測線，應(yīng)用同樣方法制備質(zhì)控線，根據(jù)生產(chǎn)工藝在規(guī)定的溫度、濕度條件下干燥，置規(guī)定的濕度（通過驗證方法確定相對濕度要求）條件下存放。檢測線與質(zhì)控線應(yīng)具有間隔距離要求，應(yīng)對所用的金標(biāo)用玻璃纖維及硝酸纖維素膜等進(jìn)行質(zhì)量檢測，如尺寸、外觀、包裝及吸附性能等，并記錄批號、數(shù)目、標(biāo)識，不同批號的玻璃纖維及硝酸纖維素膜不能混用。
（四）貼膜、切割、裝袋
貼膜、切割及裝袋應(yīng)在具有相應(yīng)濕度（通過驗證方法確定相對濕度要求）條件下操作，切割的膜條應(yīng)有寬度要求。
附件8：酶聯(lián)產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝
一、原理
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原-抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。
二、主要生產(chǎn)工藝
（一）酶標(biāo)板的制備：
1.工藝流程
（A）包被液的配制→ （C）酶標(biāo)板的包被 →（D）酶標(biāo)板封閉 → （E）酶標(biāo)板的干燥、真空包裝 ↑
（B）封閉液的配制
2.關(guān)鍵點控制
（1）包被：
1）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)；
2）包被液量控制在要求范圍內(nèi)；
3）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。
關(guān)鍵設(shè)備包括：包被機(jī)、精密天平、加樣器。
（2）封閉：
1）確認(rèn)洗板的次數(shù)；
2）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)；
3）封閉液量控制在要求范圍內(nèi)；
4）溫育或冷育的溫度、時間在要求范圍內(nèi)。
關(guān)鍵設(shè)備包括：包被機(jī)、洗板機(jī)、精密天平、加樣器。
（3）干燥、真空包裝
1）干燥的溫濕度在要求范圍內(nèi)；
2）干燥結(jié)束的酶標(biāo)板逐一裝入鋁箔袋中同時放入一袋干燥劑，裝袋同時要將酶標(biāo)板標(biāo)識不清楚的、板孔有缺損的挑出報廢。
關(guān)鍵設(shè)備包括：真空包裝機(jī)。
（二）酶標(biāo)試劑的制備：
1.工藝流程
（A）液體的配制→（B）液體的分裝
2.關(guān)鍵點控制
（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；
（2）確認(rèn)配制溶液的濃度、PH值在要求范圍內(nèi)；
（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。
關(guān)鍵設(shè)備包括：精密天平、分裝機(jī)。
（三）陰、陽性對照的制備：
1.工藝流程
（A）原料的滅活→（B）液體的配制→（C）液體的分裝
2.關(guān)鍵點控制
（1）控制滅活溫度和時間；
（2）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；
（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。
關(guān)鍵設(shè)備包括：水浴鍋、精密天平、分裝機(jī)。
（四）其他組分的制備：
1.工藝流程
（A）液體的配制→（B）液體的分裝
2.關(guān)鍵點控制
（1）液體配制過程物料量取準(zhǔn)確；
（2）確認(rèn)配制溶液的PH值在要求范圍內(nèi)
（3）控制液體分裝量范圍，要求滿足要求。
關(guān)鍵設(shè)備包括：精密天平、分裝機(jī)。
附件9：生化試劑主要生產(chǎn)工藝
生產(chǎn)流程：
容器清洗——稱量（關(guān)鍵工序）——溶解、配置（過濾）——半成品檢驗——分裝——如有凍干（特殊工序）——打印批號、貼標(biāo)、包裝、裝盒——成品檢驗
操作規(guī)程及質(zhì)量控制點：
一、主要原材料
與產(chǎn)品質(zhì)量密切相關(guān)的主要原材料包括各種酶制劑、化學(xué)試劑、抗體等。主要原料的常規(guī)檢驗項目一般包括：
（一）外觀
（二）含量（化學(xué)試劑）：根據(jù)國家、國際標(biāo)準(zhǔn)或本企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)量要求一般為分析純以上。
（三）酶活性（酶制劑）：根據(jù)通用標(biāo)準(zhǔn)或本企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。
（四）抗體效價：通過倍比稀釋法與抗原反應(yīng)進(jìn)行檢測。
二、其它
（一）包裝瓶
質(zhì)量要求：外觀、密封性、抗跌性、溶出物、脫色試驗、振蕩試驗。
（二）說明書、包裝外盒、瓶簽等標(biāo)識
參照國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療器械說明書、標(biāo)簽和包裝標(biāo)識管理規(guī)定》。
三、試劑盒生產(chǎn)的關(guān)鍵步驟及質(zhì)控項目
試劑的生產(chǎn)包括試劑的制水、配制、過濾、凍干（凍干試劑）、分包裝等步驟；并通過產(chǎn)品的半成品檢驗和成品檢驗兩個質(zhì)控過程來保證其質(zhì)量符合相關(guān)規(guī)定。
（一）制水：
使用水處理設(shè)備進(jìn)行去離子水的制備，并經(jīng)過專用管路連接到各用水點。
（二）容器清洗：
1.使用工藝用水將配制所需容器清潔。
2.質(zhì)控要求：清潔無污漬。
3.容器的清洗要按驗證方案進(jìn)行；應(yīng)有對清洗用水的要求；
4.如有對容器清洗后干燥的要求，應(yīng)有干燥過程參數(shù)的驗證報告。
（三）稱量：
1.稱量前天平應(yīng)經(jīng)過校準(zhǔn)，稱量時應(yīng)雙人復(fù)核，應(yīng)有天平調(diào)零過程；
2.天平精度應(yīng)至少高于所稱量物品最小精度的一個數(shù)量級；
（四）配制：
1.應(yīng)有攪拌方法的要求：如用攪拌機(jī)應(yīng)有速率及時間的要求，如人工攪拌應(yīng)有攪拌圈數(shù)的要求；
2.配制間溫度一般應(yīng)控制在18～25℃，配制、過濾時間不超過4小時。
（五）過濾（如有）
根據(jù)各產(chǎn)品的規(guī)程選擇不同的濾膜進(jìn)行過濾，確保溶液無雜質(zhì)、空白吸光度符合要求。
常規(guī)質(zhì)控項目：試劑外觀、空白吸光度（通過后續(xù)的半成品檢驗完成）。
（六）分裝
1.按工藝要求試劑分裝。分裝前、分裝中、分裝末均需對分裝量進(jìn)行校驗。
常規(guī)質(zhì)控項目：分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量、分裝量及分裝后密封性。
2.應(yīng)有試分裝的要求，或首瓶檢測的要求；
（七）凍干
1.使用凍干機(jī)對試劑進(jìn)行凍干。各種凍干試劑都需建立相應(yīng)的凍干工藝，凍干過程的重要參數(shù)為凍干時間、凍干壓力。
2.凍干品外觀應(yīng)該呈現(xiàn)疏松的粉末狀固體，具有一定的形狀，在規(guī)定時間內(nèi)（一般不超過60分鐘）復(fù)溶完全。
3.凍干過程一般為：預(yù)凍（降溫）——抽真空——化霜[加熱升溫（逐漸）]
（八）包裝
將試劑各組分、合格證及說明書，放入相應(yīng)的試劑盒內(nèi)。包裝時應(yīng)檢查品名、批號、失效期、裝量、規(guī)格，核對各物料數(shù)量，并在蓋盒前進(jìn)行復(fù)核。
（九）封膜
將組裝好的試劑放在自動封膜機(jī)上封裝，控制封膜時間以及封膜的溫度。確保膜完整及與試劑盒吸附緊密。
附件10：血清基質(zhì)質(zhì)控品生產(chǎn)工藝
一、血清/血漿基質(zhì)加生物活性物質(zhì)方法（適用于定值質(zhì)控）
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血的處理：1、全血加入抗凝劑，靜置，離心去除紅細(xì)胞，得到血漿�；蛘呷患涌鼓齽o置，離心去除紅細(xì)胞和纖維蛋白，得到血清。 2、56℃ 30分鐘滅活血清/血漿。 3、做生物安全性檢測。 |
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處理好的血清/血漿中加入防腐劑、穩(wěn)定劑等，得到配制質(zhì)控品的稀釋液。 |
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質(zhì)控品配制：往稀釋液中加入高濃度原料，攪拌或靜置使達(dá)到均勻。 |
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質(zhì)控品定值：建議選擇10家實驗室，計算測定值的平均值(Mean)和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)，以平均值為質(zhì)控品的靶值，平均值加減2倍或3倍標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±2SD或Mean±3SD)為質(zhì)控品的范圍。 |
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質(zhì)控品分裝 |
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如果質(zhì)控品以干粉形式保存，凍干 |
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質(zhì)控點 |
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低溫保存 |
質(zhì)控點：確定分裝、凍干后質(zhì)控品的濃度、瓶間變異、穩(wěn)定性等
二、混合血清/血漿方法（適用于定性質(zhì)控）
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血的處理：1、全血加入抗凝劑，靜置，離心去除紅細(xì)胞，得到血漿�；蛘呷患涌鼓齽�，靜置，離心去除紅細(xì)胞和纖維蛋白，得到血清。 2、56℃ 30分鐘滅活血清/血漿。 3、做生物安全性檢測。
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血清或血漿用相應(yīng)的試劑盒進(jìn)行檢測，確定每份血清/血漿的陰陽性。 |
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質(zhì)控品配制：根據(jù)檢測結(jié)果，選擇部分或全部陰性血清/血漿混合得到陰性質(zhì)控。選擇部分或全部陽性血清/血漿混合，并根據(jù)實際情況決定是否稀釋，得到陽性質(zhì)控。然后加入防腐劑、穩(wěn)定劑等。 |
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質(zhì)控品分裝 |
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如果質(zhì)控品以干粉形式保存，凍干 |
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質(zhì)控點2 |
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低溫保存 |
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質(zhì)控點1 |
質(zhì)控點1：確定混合后血清、血漿的陰陽性
質(zhì)控點2：確定分裝、凍干后質(zhì)控品的陰陽性、瓶間變異、穩(wěn)定性等
參考資料：
1.《危險化學(xué)品安全管理條例》（中華人民共和國國務(wù)院令第591號）
2.《血液制品管理條例》（中華人民共和國國務(wù)院令第208號）
3.《衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)<人間傳染的病原微生物名錄>的通知》（中華人民共和國衛(wèi)生部令第45號）
4.《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》（中華人民共和國衛(wèi)生部）
5.《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理辦法》（1987年7月10日國家計量局發(fā)布）
6.《關(guān)于公布麻醉藥品和精神藥品品種目錄（2007年版）的通知》(國食藥監(jiān)安[2007]633號)
7.《關(guān)于印發(fā)<體外診斷試劑質(zhì)量管理體系考核實施規(guī)定（試行）><體外診斷試劑生產(chǎn)實施細(xì)則（試行）>和<體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評定標(biāo)準(zhǔn)（試行）>的通知》（國食藥監(jiān)械[2007]239號）
8.《關(guān)于印發(fā)酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查等6項指導(dǎo)原則的通知》（食藥監(jiān)辦械函[2013]3號）
-《酶聯(lián)免疫法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
-《發(fā)光免疫類檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
-《核酸擴(kuò)增法檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
-《金標(biāo)類檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
-《生物芯片類檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
9.《體外診斷試劑校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）研究技術(shù)指導(dǎo)原則（報批稿）》
10.《生物制品生產(chǎn)、檢定用菌種、毒種管理規(guī)程》
11.《中國生物制品規(guī)程》
12.《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》（WS233-2002）
13.《常用危險化學(xué)品的分類及標(biāo)志》（GB13690-1992）
14.《危險貨物品名錄》（GB12268-2005）
15.《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》（GB/T21415-2008）
16.《無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范》（YY0033-2000）
某酶聯(lián)試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
7 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
|
2 |
酶標(biāo)試劑 |
6ml×1瓶 |
8 |
標(biāo)準(zhǔn)品(96ng/L) |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶標(biāo)包被板 |
12孔×8條 |
9 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
|
4 |
樣品稀釋液 |
6ml×1瓶 |
10 |
說明書 |
1份 |
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5 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2張 |
|
6 |
顯色劑B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1個 |
ELISA板的生產(chǎn)步驟：試劑準(zhǔn)備→洗滌ELISA板→包被→洗滌→檢測→封閉→洗滌干燥→分裝入庫→質(zhì)量監(jiān)控
結(jié)合物的制備流程：入庫提取原料→過碘酸鈉氧化反應(yīng)→洗滌→純化→確定最佳工作濃度→分裝保存
ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；
（3）酶的底物；
（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），（或 ）參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；
（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；
（6）洗滌液；
（7）酶反應(yīng)終止液。